هدف :
تهیه نمونه جهت بردن روی ستون کروماتوگرافی ( نمونه گذاری ) بدون اینکه به ژل ستون کروماتوگرافی آسیب زده شود .
تهیه نمونه جهت بردن روی ستون کروماتوگرافی ( نمونه گذاری ) بدون اینکه به ژل ستون کروماتوگرافی آسیب زده شود .
کاربرد :
برای نمونه گذاری روی ستون های کروماتوگرافی محتوی انواع ژل های مختلف
برای نمونه گذاری روی ستون های کروماتوگرافی محتوی انواع ژل های مختلف
مواد و تجهیزات :
۱- سانتریفوژ
۲- لوله های مخصوص سانتریفوژ
۳- فیلتر مناسب
۴- سرنگ
۵- PH متر
۶- ترازو
۷- استوانه مدرج
۸- مواد شیمیایی ( متناسب با نوع بافر شستشو مواد شیمیایی متغیر است ) .
۱- سانتریفوژ
۲- لوله های مخصوص سانتریفوژ
۳- فیلتر مناسب
۴- سرنگ
۵- PH متر
۶- ترازو
۷- استوانه مدرج
۸- مواد شیمیایی ( متناسب با نوع بافر شستشو مواد شیمیایی متغیر است ) .
ملاحظات ایمنی :
۱- برای جلوگیری از خطرات بیولوژیک , الرژیک و شیمیایی , پوشیدن روپوش و کفش و دستکش ضروری می باشد .
۲- برای جلوگیری از خراب شدن سانتریفوژ و یا بروز خطر , قبل از سانتریفوژ کردن , باید لوله های حاوی نمونه دو به دو هم وزن باشند .
۱- برای جلوگیری از خطرات بیولوژیک , الرژیک و شیمیایی , پوشیدن روپوش و کفش و دستکش ضروری می باشد .
۲- برای جلوگیری از خراب شدن سانتریفوژ و یا بروز خطر , قبل از سانتریفوژ کردن , باید لوله های حاوی نمونه دو به دو هم وزن باشند .
روش کار :
۱- ابتدا با توجه به نوع بافر شستشو باید Sample بافری از همان نوع , اما با غلظت 2 برابر تهیه می کنید .
۲- PH و دمای سمپل بافر را با PH و دمای بافر شستشو , یکسان تنظیم می کنیم .
۳- حجم نمونه خود را با استوانه مدرج اندازه بگیرید .
۴- به اندازه حجم نمونه , از سمپل بافر به آن اضافه می کنیم .( باید دمای سمپل بافر و نمونه یک اندازه باشد ) .
۵- PH را چک می نماییم . اگرPH تغییر کرد , PH را دوباره تنظیم می کنیم.
۶- اگر نمونه دارای ذرات معلق زیادی باشد , می توان نمونه را به مدت 15 دقیقه و 3000 دور سانتریفوژ کرد .
۷- سپس نمونه را توسط فیلتر و سرنگ فیلتر می کنیم .
۸- دوباره PH را چک می نماییم . اگرPH تغییر کرد , PH را دوباره تنظیم می کنیم.
۹- حال اگر نمونه ذرات معلق نداشته باشد , نمونه آماده نمونه گذاری بر روی ستون می باشد .
۱- ابتدا با توجه به نوع بافر شستشو باید Sample بافری از همان نوع , اما با غلظت 2 برابر تهیه می کنید .
۲- PH و دمای سمپل بافر را با PH و دمای بافر شستشو , یکسان تنظیم می کنیم .
۳- حجم نمونه خود را با استوانه مدرج اندازه بگیرید .
۴- به اندازه حجم نمونه , از سمپل بافر به آن اضافه می کنیم .( باید دمای سمپل بافر و نمونه یک اندازه باشد ) .
۵- PH را چک می نماییم . اگرPH تغییر کرد , PH را دوباره تنظیم می کنیم.
۶- اگر نمونه دارای ذرات معلق زیادی باشد , می توان نمونه را به مدت 15 دقیقه و 3000 دور سانتریفوژ کرد .
۷- سپس نمونه را توسط فیلتر و سرنگ فیلتر می کنیم .
۸- دوباره PH را چک می نماییم . اگرPH تغییر کرد , PH را دوباره تنظیم می کنیم.
۹- حال اگر نمونه ذرات معلق نداشته باشد , نمونه آماده نمونه گذاری بر روی ستون می باشد .
نکته :
برای اینکه نمونه بر روی ژل رسوب نکند , باید به موارد زیر دقت کرد .
۱- باید جنس بافر نمونه با جنس بافر شستشو یکسان باشد .
۲- باید PH نمونه با PH بافر شستشو یکسان باشد .
۳- باید دمای نمونه با دمای بافر شستشو یکسان باشد .
۴- باید نمونه عاری از هرگونه ذرات معلق باشد .
۵- برای یکسان سازی نمونه و بافر شستشو از دیالیز نیز می توان استفاده کرد .
برای اینکه نمونه بر روی ژل رسوب نکند , باید به موارد زیر دقت کرد .
۱- باید جنس بافر نمونه با جنس بافر شستشو یکسان باشد .
۲- باید PH نمونه با PH بافر شستشو یکسان باشد .
۳- باید دمای نمونه با دمای بافر شستشو یکسان باشد .
۴- باید نمونه عاری از هرگونه ذرات معلق باشد .
۵- برای یکسان سازی نمونه و بافر شستشو از دیالیز نیز می توان استفاده کرد .
گزارش :
۱- بر روی ظرف نمونه مشخصات آن را قید می کنیم ( تاریخ , نام شخص , مواد متشکله و PH).
۲- گزارش تهیه نمونه را در دفتر کارهای روزمره آزمایشگاه ثبت می کنیم .
۱- بر روی ظرف نمونه مشخصات آن را قید می کنیم ( تاریخ , نام شخص , مواد متشکله و PH).
۲- گزارش تهیه نمونه را در دفتر کارهای روزمره آزمایشگاه ثبت می کنیم .
هیچ نظری موجود نیست:
ارسال یک نظر