.

******************************************************************************************************************************************************************************************************************************************************
استفاده از مطالب این وبلاگ بدون ذکر منبع جایز نمی باشد
******************************************************************************************************************************************************************************************************************************************************

۱۳۸۹ خرداد ۱۷, دوشنبه

محلول سازی نمونه برای IEF

انتخاب راهکار برای محلول سازی پروتئین های موجود در نمونه ، به ماهیت نمونه بستگی دارد . در صورتیکه نمونه از بافتهای سلولی یا بافتی استخراج شده باشد ، اولین گام لیز کردن سلولها و خارج کردن محتوای پروتئینی آنهاست . روشهای شیمیایی و فیزیکی مختلفی برای لیز کردن و متلاشی کردن دیواره سلولها وجود دارد . روشهای ملایمی مانند شکستن دیواره سلولها توسط آنزیم هایی مانند لایزوزایم Lysozyme و یا روشهای خشنی مثل استفاده از پرس فرانسوی .
نمونه تهیه شده برای الکتروفورز 2 بعدی باید عاری از پیوندهای غیر کووالان باشد . یعنی پروتئین های نمونه به پلی پپتیدهای منفرد و محلول تبدیل شده باشند . و همینطور باید نمکها ، لیپیدها ، پلی ساکاریدها و اسیدهای نوکلوئیک را که در الکتروفورز 2 بعدی مزاحمت ایجاد می کنند حذف کرد . همچنین حلالیت نمونه در حین انجام الکتروفورز 2 بعدی نباید از بین رود .

ادامه دارد....

هیچ نظری موجود نیست: