رزولیشن در ستون های ژل فیلتراسیون

برای بزرگتر دیدن تصویر بر روی آن کلیک کنید

1- نمودار اول - تفکیک رضایت بخش :

بدون نقص ، پیک های متقارن


2- نمودار دوم - تفکیک ناچیز :

فاکتورهای مؤثر در تفکیک ، شامل نوع ژل انتخاب شده ، اندازه ذرات ، حجم نمونه تزریقی ، حجم ستون ، شدت جریان را بررسی نمایید .


3- نمودار سوم - ستون بدون شست و شو :

بعد از عبور بافر به اندازه Vt  ، هنوز پیک دیده می شود . همیشه بین دو تزریق نمونه در ستون ، یک مرحله شست و شو قرار دهید .

ممکن است مولکولها با ژل اتصال غیر ویژه داشته باشند . اگر اثرات متقابل ماهیت یونی داشته باشد ، برای شست وشو غلظت نمک را بالا ببرید (تا 150mM ) . این کار ممکن است به شست و شو کمک کند . اگر اثرات متقابل ماهیت هیدروفوبیک داشته باشد ، غلظت نمک را پایین آورید ، PH را بالا ببرید یا از یک دترجنت یا حلال آلی استفاده نمایید . این کار ممکن است به شست و شو کمک کند .


4- نمودار چهارم - پیک پیشتاز :

پیک نامتقارن : نمونه شسته شده ، به وسیله گزینش کردن یک راه ویژه در ستون ، قبل از حجم تهی دیده می شود . این عمل در اثر زیاد پک شدن به وسیله فشار زیاد یا سرعت زیاد ، رخ می دهد . ممکن است مجبور به پک کردن دوباره ستون شوید .


5- نمودار پنجم - پیک دنباله دار :

پیک نامتقارن : نمونه به صورت ناهموار و ناجور اعمال شده است .

اگر ممکن است بالای ستون را چک کنید . از پک شدن ستون به صورت هموار و یکنواخت و استعمال نمونه بدون آشفتگی در ستون ، مطمئن شوید . پیک های دنباله دار در اثر کم پک شدن به وجود می آید . (پک شدن به وسیله فشار کم یا سرعت کم) .